二、板栗结果与分析
1、壳原板栗壳原花青素稳定性影响因素研究
(1)光照对板栗壳原花青素稳定性的花青化影响
由图1可知,板栗壳原花青素溶液在光照条件下,素稳原花青素的定性保存率对比另外两种情况下降速度更快,同时光照条件下溶液颜色易由棕红色变成淡红色,结构及体而在室温避光和低温避光条件下,分析颜色没有明显变化;这与高凝轩等的外消实验结果一致,可能原花青素的板栗结构在光照条件下被破坏,故光照对原花青素的壳原稳定性有影响。
(2)温度对板栗壳原花青素稳定性的花青化影响
由图2可知,温度在40~60℃范围内,素稳原花青素的定性保存率基本不变,即在该温度范围内,结构及体原花青素相对比较稳定,分析降解不大;当温度高于60℃时,板栗壳原花青素保存率不断下降,高温可能导致原花青素发生氧化聚合,则板栗壳原花青素在提取、浓缩、干燥及保存过程中,应使温度低于60℃。
(3)pH对板栗壳原花青素稳定性的影响
由图3可知,当pH在1~7范围内,原花青素保存率变化很小,则此pH值范围适于原花青素的保存;当pH>7时,随着pH增大,原花青素保存率不断下降,且当pH>8时,原花青素溶液颜色发生变化;根据报道,原花青素在碱性条件下其结构易发生降解和差向异构化,导致含量下降。即碱性条件下容易造成板栗壳原花青素结构的破坏,使稳定性下降。
(4)金属离子对板栗壳中原花青素稳定性的影响
原花青素对金属离子较敏感,多价金属离子可以与原花青素的邻二酚羟基发生络合反应,形成五元环螯合物。板栗壳原花青素在K+、Na+、Al3+、Mg2+条件下没有发生变化;在Cr3+、Zn2+、Sn2+、Ca2+条件下产生少量絮状物,而在Fe3+、Fe2+、Ba2+存在的条件下产生大量黑色絮状物,这是由于Fe3+、Fe2+、Ba2+与原花青素的邻位二羟基形成了不溶性的络合物。故在原花青素样品保存过程中,应注意避免与Fe3+、Fe2+、Ba2+接触。
2、原花青素结构分析
(1)原花青素种类鉴定
板栗壳粗提物组分复杂,对比文献报道的原花青素类质荷比,选择合适的分子离子峰进行碰撞诱导解离,根据二级质谱裂解获得的碎片离子及文献进一步对比,鉴定出粗提物中原花青素种类有没食子酸、儿茶素、没食子儿茶素、B型原花青素二聚体,HPLC-MS分析结果见表1。
(2)没食子酸二级质谱裂解规律分析
没食子酸的苯环上含有3个羟基和1个羧基,在ESI-的质谱条件下失去1个H离子生成[M-H]-,以m/z169.2为母离子进行碰撞诱导解离,其主要的裂解碎片离子为m/z124.7,与文献的报道一致。分子离子裂解规律见表2,m/z124.7为失去一分子羧基所得。
(3)儿茶素二级质谱裂解规律分析
儿茶素主要的二级碎片离子有m/z124.7,178.7,204.7,244.7,与刘国强等报道的结果吻合。分子离子峰裂解规律见表2,碎片峰1的m/z24.7为A环的1,4开环裂解得到;m/z178.7为[M-H]-失去一分子C6H6O2产生的碎片离子峰;m/z204.7为[M-H]-失去两分子C2H2O产生;m/z244.7为[M-H]-失去一分子CO2所得。
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